MiR-367通过Wnt/β-catenin通路抑制成骨细胞增殖的研究

作者：马建国 高志明 靳雷

摘要：目的探究MiR-367通过Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）通路对成骨细胞增殖的抑制作用。方法培养骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）后转染miR-367模拟物或抑制物,茜素红染色观察成骨分化;培养新生大鼠成骨细胞,转染miR-367模拟物或抑制物、联合使用β-catenin激动剂SKL2001或抑制剂XAV939,采用MTT法检测细胞增殖活力,采用荧光定量PCR及Western blot检测β-catenin及成骨标志基因Runt2相关转录因子2（Runt-related transcription factor 2,RUNX2）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）、骨钙素（osteocalcin,OCN）、Ⅰ型胶原（Collagen-Ⅰ,Col-Ⅰ）的表达。结果转染miR-367模拟物或抑制物后,BMSCs茜素红染色的OD570值与转染NC模拟物或抑制物比较差异无统计学意义（P>0.05）;转染miR-367模拟物后新生大鼠成骨细胞MTS检测的OD490值及β-catenin、RUNX2、ALP、OCN、Col-Ⅰ的表达水平明显低于转染NC模拟物,转染miR-367抑制物后新生大鼠成骨细胞MTS检测的OD490值及β-catenin、RUNX2、ALP、OCN、Col-Ⅰ的表达水平明显高于转染NC抑制物（P<0.05）;转染miR-367模拟物联合SKL2001处理后新生大鼠成骨细胞中β-catenin、RUNX2、ALP、OCN、Col-Ⅰ的表达水平明显高于转染miR-367模拟物,转染miR-367抑制物联合XAV939处理后新生大鼠成骨细胞中β-catenin、RUNX2、ALP、OCN、Col-Ⅰ的表达水平明显低于转染miR-367抑制物。结论 miR-367能够抑制成骨细胞的增殖、但不影响成骨细胞的分化,这一作用可能与抑制Wnt/β-catenin通路有关。

关键字：成骨细胞;细胞增殖;细胞分化;miR-367;Wntβ-catenin通路;

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